四.GB5009.211-2014食品中叶酸的测定

1.定义：叶酸（folicacid）也叫维生素B9,是一种水溶性维生素.0.4毫克叶酸用于预防胎儿神经管畸形,斯利安叶酸项目研究,经过全国25万例中美预防神经管畸形合作项目验证 ,准妈妈在备孕期间就服用0.4毫克叶酸可以下降胎儿神经管畸形率85%,此项结果至今被全球50多个国家广泛应用.0.5毫克叶酸是用来治疗女性贫血,消费者在选择购买时一定要认真看好说明书,根据不同情况进行选择.叶酸维生素B复合体之一,相当于蝶酰谷氨酸,是米切尔从菠菜叶中提取纯化的,故而命名为叶酸.有促进骨髓中幼细胞成熟的作用,人类如缺乏叶酸可引起巨红细胞性贫血以及白细胞减少症,对孕妇尤其重要.

叶酸富含于新鲜的水果.蔬菜.肉类食品中.食物中的叶酸若经长时间烹煮,可损失50%至90%.天然叶酸广泛存在于动植物类食品中,尤以酵母.肝及绿叶蔬菜中含量比较多.含叶酸的食物很多,但由于天然的叶酸极不稳定,易受阳光.加热的影响而发生氧化,所以人体真正能从食物中获得的叶酸并不多.叶酸生物利用度较低,在45%左右.合成的叶酸在数月或数年内可保持稳定,容易吸收且人体利用度高,约高出天然制品的一倍左右.

2.食品中叶酸的测定

①原理：叶酸是鼠李糖乳杆菌生长所必需的营养素,在一定控制条件下,将鼠李糖乳杆菌液接种至含有试样液的培养液中,培养一段时间后测定透光率（或吸光度值）,根据叶酸含量与透光率（或吸光度值）的标准曲线计算出试样中叶酸的含量.

②涉及培养基种类

12406菌种储备用琼脂培养基

12305-1/12316-1叶酸测定用培养基

③培养基涉及流程详解

储备菌种的制备

将菌种鼠李糖乳杆菌转接至琼脂培养基中,在37±1摄氏度恒温培养箱中培养20至24h,连续传种2至3代.取出后放入2至4摄氏度冰箱作为储备菌株保存.每月至少传代1次,可传30代.

实验前将储备菌株接种至琼脂培养基中,在37±1摄氏度恒温培养箱中培养20至24h以活化菌株,用于接种液的制备.

注:保存数周以上的储备菌株,不能立即用作接种液制备,试验前宜连续传种2代至3代以保证细菌活力.

接种液的制备

试验前一天,取2毫升叶酸标准工作溶液和4毫升叶酸测定用培养液混匀,分装于2支5毫升离心管中,塞好棉塞,于121摄氏度高压灭菌15分钟后即为种子培养液.冷却后用接种环将活化的菌株转种至2支种子培养液中,于37摄氏度±1摄氏度恒温培养箱中培养20h至24h.取出后将种子培养液混悬,无菌操作下用无菌注射器吸取0.5毫升转种至另两支已消毒但不含叶酸的培养液中,于37摄氏度±1摄氏度再培养3h,振荡混匀,制成接种液,立即使用.