结晶紫中性红胆盐琼脂VRBA为什么不能过度加热

发布时间:

2022-12-24

作者:

国内大型生物试剂公司


MC琼脂含中性红,可以121摄氏度高压灭菌15分钟,见GB4789.35-2010,乳糖胆盐培养基也可以高温灭菌,见GBT4789.3-2003。有分解说,长时间高温结晶紫中性红胆盐琼脂会导致抑制物的降解从而降低选择性。过度加热高温会令结晶紫和中性红失效。
 
可以在盆子里煮沸(不会喷沸腾,快沸的时候,把火调小慢慢沸就好了,要溢出就从电炉上拿下来)控制着别让它溢出来就可以了,接触的用具应该不用灭菌,倒进瓶里备用。不同牌子有些VRBA写着可以高压灭菌,有些不可以。有的实验室用温度恒定的电热板,实际操作中不用具体到2分钟,加热煮沸后取下即可,不会对实验产生影响。
 
青岛日水结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)配制方法:称取本品44.5g于1L蒸馏水或去离子水中(可按比例增加或减少配制量),搅拌煮沸溶解2分钟,冷却至50—55℃倾注平板。
 
 结晶紫中性红胆盐琼脂需要高压灭菌吗?不需要高压灭菌,VRBA是选择性培养基,在其上面只大肠菌群显色。其它的菌落不会显示颜色的,所以不用灭菌的。该培养基只能够生长出大肠菌群类的菌落,而其他类的菌落生长不出来,所以不需要高压灭菌,因里面还有琼脂成分,故需要加热到沸腾,让琼脂充分溶解。并非不能够高压灭菌,而是这么做浪费。
 
百科普及:VRBA菌落显红色的原理是菌株利用乳糖产酸,中性红遇酸变红,因此菌落也是红色的,并且因为里面有胆盐,在较低pH值时会出现沉淀环,就是我们看到的菌落周围的晕圈了。但某些不利用乳糖产酸的细菌如沙门在VRBA表面生长时是无色的,但是跑到培养基内部就会变成红色了,这种菌会影响我们的判断,因此需要做BGLB来确证。
来自青岛日水生物  (结晶紫中性红胆盐琼脂VRBA为什么不能过度加热?)