控制菌检查:白色念珠菌

发布时间:

2022-12-27

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控制菌检查:白色念珠菌

 
1.供试液的制备和增菌培养
取供试品,按照“非无菌产品微生物限度检查制成1:10供试液”.取相当于1g或1毫升供试品的供试液,接种至适宜体积(经方法适用性实验确定的)沙氏葡萄糖液体培养基中,混匀,30至35摄氏度培养3至5天.
 
2.选择和分离培养
取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上,30至35摄氏度培养24至48小时.
 
3.白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落呈乳白色、偶见淡黄色,表面光滑有浓酵母气味,培养时间稍久则菌落增大,颜色变深,质地变硬或有褶皱,挑取疑似菌落接种至念珠菌显色培养基平板上,培养24-48小时(必要时延长至72h),或采用其他适宜方法进一步鉴定.
 
4结果判断
若沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上有疑似菌落生长,且疑似菌在念珠显色培养基平板上生长的菌落呈阳性反应,应进一步进行适宜的鉴定试验,确证是否为白色念珠菌,若沙氏葡萄糖琼脂平板上没有菌落生长,或疑似菌在念珠显色培养基平板上生长的菌落呈阴性反应,判供试品未检出白色念珠菌.
 
 
5相关产品配方
5.1沙氏葡萄糖液体培养基
(动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物)10.0g
(葡萄糖)20.0g
pH5.6±0.2(25摄氏度)
5.2沙氏葡萄琼脂培养基
(动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物)10.0g
Dextrose(葡萄糖)40.0g
Agar(琼脂)15.0g
pH5.6±0.2(25摄氏度)
 
原理:葡萄糖提供碳源;动物组织胃蛋白酶水解物和胰酪胨等量混合物提供氮源;琼脂是培养基的凝固剂.
5.3沙氏葡萄糖液体培养基适用性检查
分别接种不大于100cfu的白色念珠菌于被检培养基和对照培养基中,在30-35摄氏度培养短于72h,与对照培养基管比较,被检培养基管试验菌生长良好.
5.4.1培养基促生长能力检查:用涂布法分别接种不大于100cfu的白色念珠菌于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上,在不超过24h30至35摄氏度培养下,白色念珠菌在被检培养基上生长的菌落大小、形态特征应与对照培养基一致.
5.4.2用涂布法分别接种不大于100cfu的白色念珠菌于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上,在不超过24h30至35摄氏度培养下,白色念珠菌在被检培养基上生长的菌落大小、形态特征、指示剂反应情况等应与对照培养基一致.
5.4.3沙氏葡萄糖琼脂培养基在“微生物计数限度检查法”,接种白色念珠菌和黑曲霉不大于100cfu,培养温度20-25摄氏度,培养基时间不超过5天,被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内,且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致.