致泻大肠埃希氏菌套装生化鉴定管7种
发布时间：
2022-11-16
作者：
企业生产培养基
致泻大肠埃希氏菌套装生化鉴定管7种（GB 4789）
包含蛋白胨水、半固体琼脂、氰化钾、氰化钾对照、赖氨酸、氨基酸对照、尿素琼脂、氧化酶、液体石蜡
1.氰化钾试验
原理:氰化钾是细菌呼吸酶系统的抑制剂,可与呼吸酶作用使酶失去活性,抑制细菌的生长,但有的细菌在一定浓度的氰化钾存在时仍能生长,以此鉴别细菌.
试验方法:取培养18～24h的营养肉汤培养液或菌落1环，接种至对照培养基及氰化钾培养基内，立即以橡胶塞塞紧，36±1 ℃培养24～ 48h，观察结果。
结果记录:对照管有菌生长，试验管有菌生长为阳性。对照管有菌生长，试验管无菌生长为阴性。
2.尿素酶实验
原理：有些细菌能产生尿素酶，将尿素分解、产生2个分子的氨，使培养基变为碱性，酚红呈粉红色。尿素酶是诱导酶，因为不论底物尿素是否存在，细菌均能合成此酶。其活性最适pH为7.0。
试验方法：挑取18~24h待试菌培养物穿刺并涂布于琼脂斜面，不要到达底部，留底部作变色对照。30~35℃培养24h观察结果。变为粉红色为阳性。
3.三糖铁(TSI)琼脂斜面
本培养基适合于肠杆菌科的鉴定。用于观察细菌对糖的利用和硫化氢（变黑）的产生。
原理：该培养基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例为10:10:1，只能利用葡萄糖的细菌，葡萄糖被分解产酸可使斜面变黄，但因量少，生成的少量酸，因接触空气而氧化，加之细菌利用培养基中含氮物质，生成碱性产物，故使斜面后来又变红，底部由于是在厌氧状态下，酸类不被氧化，所以仍保持黄色。而发酵乳糖的细菌，则产生大量的酸，使整个培养基呈现黄色。如培养基接种后产生黑色沉淀，是因为某些细菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应，生成黑色的硫化亚铁沉淀。
试验方法：挑取18~24h待试菌培养物穿刺并涂布于琼脂斜面，30~35℃培养24h观察结果。
44102：斜面呈黄色，底部培养基破裂
福氏志贺氏菌：底部黄色，斜面呈红色
鼠伤寒沙门氏菌：斜面呈黑色，底部培养基破裂
4.MUG试验
原理：菌的葡萄糖醛酸苷酶在碱性条件下，作用于4－甲基伞形酮－β－D葡萄糖醛酸苷（4－Methylumbellifery－β－D－Glucuronide简称MUG）的β糖醛酸苷键，使其水解，释放的4－甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。试验方法：挑取18~24h待试菌培养物穿刺并涂布于琼脂斜面，30~35℃培养24h观察结果。