环境因素对微生物生长的影响

发布时间:

2022-12-27

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环境因素对微生物生长的影响

一实验原理
不同微生物对物理环境有不同的要求.
温度影响微生物生长于存活的重要因素之一.最适生长温度能促进微生物生长,反之会导致微生物形态和代谢的改变或使微生物凝固变性而死亡.不同的微生物对温度的抗性不同.每种微生物只能在一定的温度范围内生长.
氧各种微生物对氧的要求不同,根据对氧的要求不同可将微生物分为专性好氧菌,兼性厌氧菌,微耗氧菌,耐氧菌和厌氧菌5类.
渗透压不同微生物对渗透压的抗性不同.微生物对渗透压的抗性都有一定的限度,超过一定的限度则使菌体生长受到抑制,只有在一定的渗透压范围内微生物才能正常生长繁殖.
二实验器材
大肠杆菌,枯草芽孢杆菌,酿酒酵母
牛肉膏蛋白胨固体试管培养基4支,液体培养基16支,蔗糖含量分别为2%,10%,20%,40%的合成培养基,NaCl量分别为2%,10%,20%,40%的牛肉膏蛋白胨固体培养基
恒温水浴锅,温度计,无菌培养皿等
 
三操作步骤
温度对微生物生长的影响
将培养48h的大肠杆菌和枯草芽孢杆菌斜面加无菌水各5毫升,刮下菌苔,制成菌悬液.
将液体培养基8支,编号并注明接种菌名,处理温度及时间.
接种在单号各管中接入大肠杆菌悬液0.2毫升,双号接入枯草芽孢杆菌悬液0.2毫升.
处理将已接种的前4号同时放入50摄氏度水浴中处理,10分钟后取出前2号,又10分钟后取出后2号.则5~8号管放入100摄氏度水浴中,10分钟后取出前2号,又10分钟后取出后2号.
培养各管取出后立即用冷水冲凉.在37摄氏度培养24h,观察生长情况.
温度对微生物的影响结果记录
温度
50℃处理
10分钟
50℃处理
20分钟
100℃处理
10分钟
100℃处理
20分钟
枯草杆菌        
大肠杆菌        
氧对微生物生长的影响
将牛肉膏蛋白胨固体试管培养基4支融化.
待培养基按无菌操作接种大肠杆菌,枯草芽孢杆菌或酵母菌,另一支不接种.
凝固后置28摄氏度培养,48h连续观察数天,至结果清晰为止.
氧对微生物生长的影响结果记录
观察天数 24h 48h
大肠杆菌    
酵母菌    
渗透压对微生物生长的影响
将含有不同量蔗糖和NaCl的牛肉膏蛋白胨固体培养基融化,冷却至45摄氏度左右时,各倒平皿;两套.
在已凝固的平皿背面划成两半,各接种大肠杆菌,酿酒酵母.置28摄氏度培养4d观察.
渗透压对微生物的影响结果记录
  培养时间 0.5%NaCl 2%NaCl 10%NaCl 20%NaCl
酿酒酵母          
大肠杆菌          
化学因素对微生物生长的影响
 
实验原理
常用的化学消毒剂主要有重金属及其盐类,它们的杀菌或抑菌作用主要是使菌体蛋白质变性,或与酶的-SH基结合,使酶失去活性等.本实验通过观察某些常用化学药剂在一定浓度下对微生物的致死或抑菌作用,以了解它们的杀菌或抑菌性能.
不同微生物生长要求的最适pH不同.当环境pH超出生长的范围时,微生物生长就受到抑制.
 
实验器材
金黄色葡萄球菌,枯草杆菌,酿酒酵母,黑曲霉
牛肉膏蛋白胨固体培养基,豆芽汁蔗糖培养液
新洁尔灭,酒精,结晶紫,K2HPO4,H3BO3,柠檬酸,NaOH
培养皿,滤纸片,试管,吸管
 
操作步骤
化学药剂的杀菌作用
在培养18~20h的金黄色葡萄球菌的斜面中,加入4毫升生理盐水/无菌水,用接种环按无菌操作,轻轻将菌苔刮下,震荡,制成均匀的菌悬液.
用无菌吸管吸取菌液0.2毫升,注入无菌平皿内.
将已融化且冷却到45摄氏度左右的牛肉膏蛋白胨培养基,倒入平皿内(12毫升左右),充分摇匀,水平放置,待凝.
用记号笔在已凝固的培养基的平皿底划分出5个区域,并标明下述各种药物的名称及浓度.将浸好药物的滤纸片置于平板对应区域.
将含菌平皿于37摄氏度下培养.24h后观察结果.测量抑菌圈的直径,比较各种化学药物杀菌力的强弱.
化学因素的影响结果记录
化学试剂
75%
酒精
0.25%
新洁尔灭
0.005%
结晶紫
0.05%
结晶紫
无菌水
金黄色葡萄球菌(cm)          
不同pH值对微生物生长的影响
配制豆芽汁蔗糖培养液,根据下表分别调pH值为3,5,7,9,11,每管装10毫升,每种pH值配5管,共5套,其中一套作为对照.
豆芽汁培养基黄豆芽200g,蔗糖20g,加水1000毫升,煮沸30分钟,pH自然,过滤后补足水分,121摄氏度湿热灭菌后存放备用,此即为50%的豆芽汁.
细菌培养:10%豆芽汁200毫升,葡萄糖(或蔗糖)50g,水800毫升,pH7.2~7.4.
霉菌或酵母菌培养:10%豆芽汁200毫升,糖50g,水800毫升,自然pH.霉菌用蔗糖,酵母菌用葡萄糖.
对配好的培养液进行间歇灭菌,即在100摄氏度下蒸3次,每次20分钟.
用生理盐水分别将大肠杆菌和黑曲霉制成菌悬液.
在一套不同pH值的试管内分别加枯草芽孢杆菌液2滴,摇匀.以同样方法分别接入细黄(泾阳)链霉菌,酿酒酵母和黑曲霉菌液.与对照一起置于28摄氏度下培养.3d后,取出观察结果,并于对照比较.
根据菌液的混浊程度,记录各管的生长情况.以“-”表示不生长,“+”表示生长较差,“++”表示生长一般,“+++”表示生长较好.
不同pH值对微生物生长的影响结果记录